单标信号放大试剂盒Plus版(TYR620/兔二抗)
TYR-620Plus 型 TSA 酪酰胺信号放大试剂盒，200 浓缩型荧光染料搭配专用 TSA 缓冲液，稀释比例 1:50-1:400 灵活可调，实现 10-100 倍信号增强。配套 HRP 山羊抗兔二抗，支持同源兔一抗多重免疫荧光染色，适配石蜡冰冻组织切片，全套即用型试剂，干固型抗淬灭封片剂，广泛应用于肿瘤病理、低丰度蛋白高灵敏原位检测。
TYR-620Plus 型 TSA 酪酰胺信号放大试剂盒，200 浓缩型荧光染料搭配专用 TSA 缓冲液，稀释比例 1:50-1:400 灵活可调，实现 10-100 倍信号增强。配套 HRP 山羊抗兔二抗，支持同源兔一抗多重免疫荧光染色，适配石蜡冰冻组织切片，全套即用型试剂，干固型抗淬灭封片剂，广泛应用于肿瘤病理、低丰度蛋白高灵敏原位检测。
一、产品概述
TYR-620Plus 型 TSA 酪酰胺信号放大试剂盒，是基于酪酰胺信号放大（TSA）技术开发的浓缩型高灵敏度免疫荧光检测试剂。试剂盒采用 200× 浓缩型 TYR-620 红色荧光染料，搭配专属 TSA 反应缓冲液，可根据实验需求灵活调整稀释比例；结合 HRP 标记山羊抗兔二抗，通过酶促共价沉积反应实现靶标信号10-100 倍增强。产品支持单标免疫荧光高灵敏检测，也可通过热修复洗脱循环开展双标、三标及更高重数多重免疫荧光（mIHC）实验，突破传统多重染色的一抗种属匹配限制，全部靶标均可使用兔源单克隆抗体，仅需一支 HRP 抗兔二抗即可完成多轮标记。试剂盒配套从封闭、染色到封片的全套即用型试剂，适配石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片等多种样本，广泛应用于肿瘤病理、组织微环境、低丰度蛋白原位检测等科研场景。
二、检测原理
酪酰胺信号放大（TSA）是一种 HRP 酶介导的原位共价信号放大技术，原理与免疫组化 DAB 显色体系同源。
1. 样本经兔源一抗孵育后，结合 HRP 标记山羊抗兔二抗，形成抗原 - 抗体 - 酶复合物；
2. 将 TYR-620Plus 浓缩荧光染料与 TSA buffer 按比例稀释配制成工作液，加入样本后，在过氧化氢与 HRP 的共同催化下，酪胺荧光基团被活化为高活性自由基；
3. 活化的荧光自由基与抗原周边蛋白的酪氨酸、色氨酸、组氨酸残基发生共价结合，在靶标位点大量沉积，实现 10-100 倍信号放大；
4. 通过热修复（微波 / 煮沸 / 水浴）或抗体洗脱液处理，仅洗脱非共价结合的一抗 - 二抗 - HRP 复合物，共价锚定的荧光信号稳定保留；
5. 更换下一靶标兔源一抗与对应颜色酪胺底物，循环上述步骤即可实现同源兔一抗多重荧光标记，无抗体交叉反应，无需匹配多物种一抗。
本系列可兼容 TYR-480/520/570/620/690/780 全光谱 Plus 荧光染料，可自由组合实现 2-7 重超多重免疫荧光染色。
三、产品应用
1. 低丰度靶标高灵敏检测：解决常规免疫荧光弱表达蛋白信号弱、背景高的问题，显著提升阳性检出率；
2. 多重免疫荧光（mIHC）实验：支持同源兔一抗多轮循环染色，用于肿瘤微环境、免疫细胞亚群、细胞空间分布分析；
3. 肿瘤病理研究：胃癌、肠癌、肺癌、肝癌等肿瘤组织多标志物原位表达与共定位分析；
4. 基础医学与免疫研究：炎症、纤维化、神经科学、器官损伤等疾病机制研究；
5. 类器官与细胞实验：类器官切片、细胞爬片多靶标荧光标记、药物筛选与药效评估。
四、产品核心特点
1. 浓缩型染料，性价比更高：TYR-620Plus 为 200× 浓缩型荧光染料，可灵活调整稀释比例，适配不同强度的信号需求，降低实验成本；
2. 专用缓冲液，反应更稳定：配套专属 TSA buffer，优化反应体系 pH 与离子强度，保证酶促反应效率稳定，批间差异小；
3. 稀释比例灵活可调：推荐稀释范围 1:50-1:400，可根据一抗孵育条件、抗原表达丰度自由优化，1:200 为通用最优比例；
4. 突破种属限制：所有靶标均可使用兔单克隆一抗，通用一支 HRP 山羊抗兔二抗，无需匹配多物种抗体，零交叉干扰；
5. 荧光共价结合，稳定性强：酪胺荧光与组织蛋白共价结合，耐高温洗脱、耐多轮循环，多重染色信号不丢失；
6. 全套试剂配齐：包含浓缩荧光染料、TSA 缓冲液、HRP 二抗、DAPI 染液、抗体稀释液、过氧化氢、干固型抗淬灭封片剂，开箱即用；
7. 干固型封片剂：抗荧光淬灭封片剂为干固型，封片后切片不易流动，长期保存荧光不易淬灭；
8. 多色拓展性强：可与 TYR 系列其他 Plus 染料自由搭配，轻松实现单标至多重重免疫荧光染色。
五、试剂盒组分规格
组分名称 | 货号 | 20T 规格 | 100T 规格 | 保存条件 |
TYR-620Plus 荧光染料 | RC003 | 浓缩型，10μL（200×） | 浓缩型，50μL（200×） | 4℃ |
TSA buffer | RCB0086 | 1.6mL | 8mL | 4℃ |
HRP 山羊抗兔二抗 | RCA054 | 1.6mL | 8mL | 4℃ |
DAPI 染液（即用型） | RC05 | 2mL | 10mL | 4℃ |
抗体稀释液 | RC01 | 2mL | 10mL | 4℃ |
3% 过氧化氢 | RC012 | 2mL | 10mL | 4℃ |
抗荧光淬灭封片剂（干固型） | RC06 | 2mL | 10mL | 4℃ |
六、染料使用说明
TSA 荧光染料工作液配制：将 TYR-xxxPlus 荧光染料与 TSA buffer 按比例混匀，现配现用。
标准推荐比例：TYR-620Plus : TSA buffer = 1 : 200，多数实验条件下可获得最优信噪比；
优化调整范围：推荐稀释比例区间为 1:50 ~ 1:400，可根据样本抗原丰度、一抗孵育条件灵活调整：
一抗常温孵育 1h-3h：建议稀释比例 1:50 ~ 1:200；
一抗 4℃过夜孵育（12h 及以上）：建议稀释比例 1:200 ~ 1:400 或更高。
七、简要实验流程
详细标准化操作步骤，请参照配套技术文档《多重免疫荧光实验流程》
1. 样本前处理：石蜡切片脱蜡水化 / 冰冻切片复温，进行抗原修复；
2. 内源酶封闭：3% 过氧化氢孵育，封闭组织内源性过氧化物酶；
3. 封闭与一抗孵育：抗体稀释液封闭非特异性位点，加入兔源一抗孵育；
4. 二抗孵育：滴加 HRP 山羊抗兔二抗，室温孵育；
5. TSA 荧光显色：配制 TYR-620Plus 工作液，滴加样本进行显色反应；
6.（多重染色循环）热修复洗脱非共价抗体复合物，更换下一靶标一抗与对应荧光底物，重复上述步骤；
7. 核染色与封片：DAPI 染核，干固型抗荧光淬灭封片剂封片，荧光显微镜 / 共聚焦显微镜成像。
八、产品成像示例
（A）人输卵管组织：指标 A（570 黄）＋指标 B（520 绿）＋指标 C（690 粉）
（B）小鼠肾组织：指标 A（570 黄）＋指标 B（520 绿）＋指标 C（690 粉）
（C）人胃癌肿瘤组织：指标 A（690 粉）＋指标 B（620 红）＋指标 C（570 黄）＋指标 D（520 绿）
（D）人肠组织：指标 A (570 黄)＋指标 B (520 绿) ＋指标 C (690 粉) ＋指标 D (620 红) ＋指标 E (480 青)
