鬼笔环肽染色(细胞骨架)

鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蘑菇的环状肽,可特异性结合F-肌动蛋白(F-actin),广泛应用于细胞骨架形态观察。通过与荧光染料(如FITC、TRITC)偶联,鬼笔环肽染色能清晰显示细胞内的微丝网络分布,具有高亲和力和低背景干扰特性。该技术无需转染或基因修饰,操作简便(30分钟即可完成),适用于细胞迁移、形态学分析及药物毒性评估等研究,是细胞生物学和病理学中可视化细胞骨架结构的金标准方法。

¥60元/样
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一、技术简介

鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蘑菇的环肽化合物,能特异性、高亲和力结合F-肌动蛋白(F-actin),是细胞骨架研究的金标准探针。通过与荧光染料(如FITC、TRITC、Alexa Fluor®系列)偶联,可在免疫荧光染色中清晰显示微丝骨架的形态、分布及动态变化。

技术优势
高特异性:仅结合聚合态F-actin,不结合G-actin(单体肌动蛋白)。
无需抗体:直接染色,避免一抗/二抗的非特异性结合问题。
兼容性强:可与DAPI、微管蛋白(Tubulin)、细胞膜标记等共标。

二、技术服务内容

1. 适用样本类型

细胞样本:贴壁细胞、悬浮细胞、原代细胞、3D细胞球。

组织样本:冰冻切片、石蜡切片(需抗原修复)。

2. 标准实验流程

样本固定与透化

4%多聚甲醛固定 → 0.1% Triton X-100透化(维持细胞骨架结构)。

鬼笔环肽染色

荧光标记Phalloidin(如Alexa Fluor 488,1:100–1:500稀释)避光孵育30–60分钟。

核染色(可选)

DAPI或Hoechst复染细胞核。

成像与分析

共聚焦显微镜:高分辨率Z-Stack成像,三维重构细胞骨架网络。

超分辨显微镜(如STORM/SIM):纳米级观察微丝排布。

定量分析:荧光强度统计、微丝取向分析(如纤维长度、密度)。

3. 数据交付

高清荧光图像、3D重构视频、定量分析报告(如应力纤维形成比例)。

三、技术优势

高信噪比:荧光标记Phalloidin背景低,信号稳定。

灵活标记:提供多种荧光选择(FITC/TRITC/Alexa Fluor 647等)。

快速高效:全程1–2小时完成,适合大批量样本。

动态研究:可结合活细胞成像(需使用细胞穿透性Phalloidin衍生物)。

四、典型应用场景

细胞形态与迁移研究

肿瘤细胞侵袭、伤口愈合(划痕实验)中的骨架重组。

药物机制研究

细胞松弛素(Cytochalasin)、Latrunculin等药物对微丝的破坏效应。

疾病模型分析

神经退行性疾病(如阿尔茨海默病)中突触的骨架异常。

发育生物学

胚胎发育中细胞极性与骨架动态变化。

五、客户须知

样本要求

细胞贴壁良好,避免固定前脱落。

组织切片需避免反复冻融。

注意事项

Phalloidin具有毒性,操作时需佩戴防护用具。

长期光照可能淬灭荧光信号,建议避光保存样本。

六、延伸服务

多色共标:与Tubulin(微管)、Vinculin(黏着斑蛋白)共染,研究细胞骨架互作。

活细胞成像:使用非毒性Phalloidin衍生物(如SiR-actin)实时追踪骨架动态。

AI图像分析:自动量化微丝排列方向性(如迁移细胞前导边缘)。

:可根据客户需求定制方案,以上信息仅供参考。


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