EU3135/OVA(Ovalbumin) ELISA Kit
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA),通过预包被在酶标板上的抗OVA抗体捕获样本中的OVA,再依次加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素,最终通过TMB显色反应定量检测OVA浓度。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA),通过预包被在酶标板上的抗OVA抗体捕获样本中的OVA,再依次加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素,最终通过TMB显色反应定量检测OVA浓度。
一、产品基本信息
产品名称:OVA (Ovalbumin) ELISA Kit
别称:OVA ELISA Kit, Ovalbumin ELISA Kit
货号:EU3135
规格:48T/96T
种属:Universal
UniProt ID:P01012
二、检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA),通过预包被在酶标板上的抗OVA抗体捕获样本中的OVA,再依次加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素,最终通过TMB显色反应定量检测OVA浓度。
三、产品特点
高灵敏度:最低检测限为0.469 ng/mL,线性范围0.781-50 ng/mL
高特异性:仅特异性结合OVA,与其他类似蛋白无交叉反应
稳定可靠:板内和板间变异系数(CV)均小于6%,重复性好
操作简便:总反应时间仅需4小时,提供即用型试剂
四、适用样本类型
血清、血浆
细胞培养上清液、细胞裂解液、组织裂解液
其他生物液体样本
五、试剂盒组成
组件编号 名称 规格(48T) 规格(96T) 开启后保存条件
E001 Elisa酶标板(可拆卸) 8孔×6条 8孔×12条 2-8°C保存1个月;-20°C保存6个月
E002 冻干标准品 1支 2支 2-8°C保存1个月;-20°C保存6个月
E003 浓缩生物素-抗体(100X) 60 μL 120 μL 2-8°C避光保存
E034 浓缩HRP-链霉亲和素(100X) 60 μL 120 μL 2-8°C避光保存
E024 TMB显色底物 5 mL 10 mL 2-8°C避光保存
E039 样品稀释液 10 mL 20 mL 2-8°C保存
E040 抗体稀释液 5 mL 10 mL 2-8°C保存
E049 SABC稀释液 5 mL 10 mL 2-8°C保存
E026 反应终止液 5 mL 10 mL 2-8°C保存
E038 浓缩洗涤液(25X) 15 mL 30 mL 室温保存
E006 覆膜 3张 5张 室温保存
E007 说明书 1份 1份 -
六、自备实验器材
酶标仪(450 nm滤光片)
37°C恒温箱(不推荐使用CO₂培养箱)
自动洗板机或多道移液器(手工洗板需5 mL滴管)
精密单道及多通道移液器(0.5-1000 μL)
无菌EP管、一次性吸头、吸水纸、加样槽
去离子水或蒸馏水
七、操作步骤概要
加样孵育:每孔加入100 μL标准品或待测样本,覆膜后37°C孵育90分钟
洗板:弃去液体,洗涤2次(不浸泡)
加检测抗体:每孔加入100 μL生物素-抗体工作液,覆膜后37°C孵育60分钟
洗板:弃去液体,洗涤3次(每次浸泡1分钟)
加酶联试剂:每孔加入100 μL HRP-链霉亲和素工作液,覆膜后37°C孵育30分钟
洗板:弃去液体,洗涤5次(每次浸泡1分钟)
显色:每孔加入90 μL TMB显色底物,覆膜后37°C避光孵育10-20分钟
终止与检测:每孔加入50 μL终止液,立即测定450 nm处OD值
八、标准曲线数据
| OVA浓度(ng/mL) | OD-1 | OD-2 | 平均值 |
|---|---|---|---|
| 0 | 0.081 | 0.083 | 0.082 |
| 0.781 | 0.125 | 0.129 | 0.127 |
| 1.562 | 0.246 | 0.254 | 0.250 |
| 3.125 | 0.400 | 0.412 | 0.406 |
| 6.25 | 0.517 | 0.531 | 0.524 |
| 12.5 | 0.783 | 0.805 | 0.794 |
| 25 | 1.344 | 1.384 | 1.364 |
| 50 | 2.028 | 2.086 | 2.057 |

九、性能验证
回收率
血清:86-99%(平均91%)
EDTA血浆:85-101%(平均94%)
肝素血浆:88-105%(平均98%)
线性度
血清稀释2-8倍,回收率81-101%
血浆稀释2-8倍,回收率82-102%
精密度
板内CV:4.62-5.99%
板间CV:4.89-5.62%
稳定性
未拆封试剂盒在2-8°C保存6个月,活性保持95-100%
十、注意事项
样本处理:避免反复冻融,建议分装保存
显色控制:TMB孵育时间需严格控制在10-20分钟
标准曲线:每次实验需重新绘制
上海睿远生物医药科技有限公司
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