免疫组化染色（Immunohistochemistry，IHC）是一种利用抗原-抗体特异性结合的原理，对组织或细胞中的特定抗原进行定位、定性和定量研究的实验技术。该技术将免疫学原理与组织化学技术相结合，通过标记抗体与目标抗原结合，并利用显色反应或荧光信号进行可视化，从而实现对目标蛋白的表达水平、分布位置及功能状态的研究。石蜡切片技术是将组织样本经过固定、脱水、透明、浸蜡等处理后，包埋在石蜡中，然后用切片机切成薄片的技术。石蜡切片可以长期保存，并且便于进行各种染色和观察，是组织学和病理学研究中最常用的样本制备方法之一。
| 产品名称 | 免疫组化 |
|---|---|
| 送样运输要求 | 送样运输要求： 1、石蜡切片 样本离体后将样本放于口径大于样本直径的管中，组织固定液（推荐使用货号RCF-02）必须高于组织表面，多于组织体积4-10倍。样本离体0.5h内必须放入固定液固定，通常在标本充分固定12-24h侯进行取材，常温保存和运输。 2、冰冻切片 固定组织的冰冻切片，常温运输（如果夏天温度太高可以在运输时垫少量冰袋）； 新鲜组织的冰冻切片干冰运输和-20℃保存；如您的冰冻样本需要做自发荧光，请进行避光处理，用锡箔纸包裹或其他避光方式。 3、细胞爬片 细胞爬片送样前，先用4%多聚甲醛固定15min，然后加入占孔体积的2/3PBS，注意PBS需要覆盖样本，4℃运输和保存。 4、荧光四标以上只能做石蜡包埋切片，不能做冰冻切片和细胞爬片。 一抗选择注意事项： 1、如样本是石蜡切片或冰冻切片，应选择适用于IHC的一抗； 2、如样本是细胞爬片，应选择适用于ICC/IF的一抗。 |
一、 技术简介
免疫组化染色（Immunohistochemistry，IHC）是一种利用抗原-抗体特异性结合的原理，对组织或细胞中的特定抗原进行定位、定性和定量研究的实验技术。该技术将免疫学原理与组织化学技术相结合，通过标记抗体与目标抗原结合，并利用显色反应或荧光信号进行可视化，从而实现对目标蛋白的表达水平、分布位置及功能状态的研究。
石蜡切片技术是将组织样本经过固定、脱水、透明、浸蜡等处理后，包埋在石蜡中，然后用切片机切成薄片的技术。石蜡切片可以长期保存，并且便于进行各种染色和观察，是组织学和病理学研究中最常用的样本制备方法之一。
二、 技术流程
免疫组化染色（及石蜡切片）技术流程主要包括以下步骤：
样本采集与固定: 采集新鲜组织样本，并使用合适的固定液（如福尔马林）进行固定，以保持组织结构和抗原的完整性。
石蜡包埋: 将固定后的组织样本经过脱水、透明、浸蜡等处理后，包埋在石蜡中，制成石蜡块。
切片: 使用切片机将石蜡块切成厚度为4-5微米的薄片，并将其裱贴在载玻片上。
脱蜡与水化: 将切片依次放入二甲苯和梯度酒精中，去除石蜡并使组织水化。
抗原修复: 使用热诱导抗原修复或酶消化等方法，暴露被掩盖的抗原表位，提高抗体与抗原的结合效率。
封闭: 使用血清或BSA等封闭剂封闭非特异性结合位点，减少背景染色。
一抗孵育: 将切片与针对目标抗原的一抗孵育，使一抗与抗原特异性结合。
二抗孵育: 将切片与标记有酶或荧光素的二抗孵育，使二抗与一抗结合。
显色反应: 使用显色底物（如DAB）进行显色反应，生成有色沉淀物，从而可视化目标抗原。
复染: 使用苏木素等染料对细胞核进行复染，便于观察组织形态结构。
脱水、透明与封片: 将切片依次放入梯度酒精和二甲苯中脱水透明，然后使用中性树胶封片，长期保存。
三、 技术优势
特异性强: 利用抗原-抗体特异性结合的原理，能够特异性地检测目标蛋白的表达。
定位准确: 可以在组织或细胞水平上精确定位目标蛋白的表达位置。
灵敏度高: 通过信号放大系统，可以检测到低丰度的目标蛋白。
应用广泛: 可用于研究各种组织、细胞和蛋白质的表达和功能。
四、 应用领域
免疫组化染色（及石蜡切片）技术可应用于以下领域：
生物标志物研究: 筛选和验证疾病相关的生物标志物，用于疾病诊断、预后评估和治疗靶点筛选。
肿瘤研究: 研究肿瘤发生发展机制、肿瘤微环境、肿瘤异质性等。
神经科学研究: 研究神经系统发育、功能及疾病机制。
药物研发: 评估药物靶点表达、药物作用机制及疗效。
五、 注意事项
样本处理过程中要注意避免抗原的损失和破坏。
抗体选择要慎重，确保抗体的特异性和灵敏度。
实验操作要规范，避免污染和非特异性染色。
结果分析要结合组织形态学和临床资料进行综合判断。
六、 总结
免疫组化染色（及石蜡切片）技术是一种重要的实验技术，在生物医学研究和临床诊断中发挥着重要作用。随着技术的不断发展，免疫组化染色技术将会在更广泛的领域得到应用。
