单标信号放大试剂盒 (TYR520 / 兔二抗)

一、产品简介

TSA酪酰胺信号放大试剂盒TYR520（兔二抗体系）是基于经典Tyramide Signal Amplification技术研发的高灵敏度免疫荧光检测试剂，专为低丰度蛋白检测、同源兔一抗多重荧光染色、肿瘤微环境多靶标原位分析设计。本试剂盒采用TYR520绿色荧光通道，可实现10–100倍信号放大，支持单标免疫荧光及多轮循环多重mIHC染色，彻底解决传统免疫荧光信号弱、背景高、一抗种属匹配受限等实验难题。适配石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、类器官样本，广泛用于病理科研、肿瘤免疫、机制研究、高分文章多重荧光实验，是目前超多重免疫荧光实验的主流核心试剂盒。

二、产品概述

慧蓝生物TSA-TYR520信号放大试剂盒（兔二抗体系）为即用型超多重免疫荧光检测试剂，整套体系优化成熟，无需用户自行配比试剂。依托HRP酶促酪胺沉积放大技术，可对组织及细胞样本中的低表达抗原进行超强信号增益，大幅提升弱表达蛋白的阳性检出率。

本试剂盒统一适配全部兔源一抗，仅需搭配一支HRP山羊抗兔二抗，即可通过热修复洗脱循环实现多张兔一抗同片多标，彻底打破传统多重荧光对一抗种属来源的限制。TYR520绿色荧光通道成像稳定、信噪比高、荧光淬灭慢，可单独单标使用，也可搭配TYR480/570/620/690/780多色酪胺染料实现2–7重超多重免疫荧光染色，适配普通荧光显微镜、共聚焦显微镜、多通道全景扫描系统。

三、技术原理

TSA酪酰胺信号放大技术是一种HRP酶介导的原位共价信号放大技术，原理优于传统间接免疫荧光法，也是目前高分文献多重免疫荧光（mIHC）的标准技术方案。

1、样本经一抗孵育后，结合HRP标记山羊抗兔二抗，形成稳定免疫复合物；

2、在H₂O₂催化条件下，体系内TYR520酪胺荧光底物被快速活化，生成高活性自由基；

3、活化荧光自由基可与抗原周边蛋白的酪氨酸、色氨酸、组氨酸残基共价结合，在靶标位置大量沉积荧光信号，实现10–100倍信号放大；

4、共价结合的荧光基团耐高温、耐洗脱，可通过微波、煮沸、水浴热修复方式，洗脱非共价结合的一抗/二抗复合物，保留荧光信号；

5、重新孵育下一指标兔源一抗与对应颜色酪胺底物，循环往复，实现同源兔一抗多轮多重荧光标记，无抗体交叉干扰、无种属限制。

四、产品组分规格

试剂盒分为20T、100T两种规格，全组分即用型，配套完整前处理、染色、封片试剂，无需额外采购辅料。

五、实验流程简述

样本前处理（脱蜡、水化、抗原修复）→内源过氧化物酶封闭→样本封闭→兔源一抗孵育→HRP二抗孵育→TSA-TYR520荧光信号放大反应→DAPI核染色→抗淬灭封片→荧光成像。

多重荧光实验可在单标基础上进行热修复洗脱，去除非共价抗体复合物，保留共价荧光信号，更换不同靶标一抗与不同颜色酪胺染料，循环染色，实现多指标共定位分析。

六、产品应用领域

• 低丰度蛋白检测：解决常规免疫荧光、免疫组化弱表达指标无信号、信号模糊、背景高等问题，显著提升阳性检出率；

• 超多重免疫荧光mIHC实验：支持同源兔一抗2–7重多标染色，用于肿瘤微环境、免疫浸润、细胞亚群空间分布分析；

• 肿瘤病理科研：胃癌、肠癌、肺癌、肝癌、乳腺癌等肿瘤组织原位标志物表达与机制研究；

• 基础医学与免疫研究：炎症模型、纤维化模型、神经组织、脏器损伤机制、免疫代谢通路研究；

• 类器官与细胞实验：类器官切片、细胞爬片多靶标荧光标记、药物筛选、药效评估；

• 高分文章成像：适配多通道荧光扫描、全景组织成像、共聚焦精细定位分析。

七、产品核心优势

• 百倍信号放大，灵敏度极高：TSA酶促放大技术，相比普通免疫荧光提升10–100倍信号，弱表达抗原也可清晰成像；

• 突破种属限制，实验设计极简：所有指标均可使用兔单克隆一抗，通用一支兔二抗，无需匹配多物种一抗，零交叉干扰；

• 荧光共价结合，稳定性极强：酪胺荧光与组织蛋白共价结合，耐高温洗脱、耐多轮修复，多重染色不丢信号；

• 全组分即用型，开箱即用：封闭液、双氧水处理、二抗、染料、核染、封片剂全套配齐，无需自行配制；

• 多色自由组合，扩展性强：可搭配TYR480/570/620/690/780全系染料，轻松实现单标至七重超多重荧光；

• 成像效果优异：TYR520绿光通道背景低、信噪比高、抗淬灭能力强，适配各类主流成像设备；

• 适配样本广泛：兼容石蜡切片、冰冻切片、细胞样本、类器官样本，通用性强；

• 批次稳定、重复性高：每批次经过组织实测验证，批间差异小，适合大批量科研实验与课题研究。

八、参考文献

[1] Tyramide Signal Amplification (TSA)技术在组织原位高灵敏度检测中的应用进展

[2] 超多重免疫荧光mIHC技术在肿瘤微环境研究中的应用规范