单标信号放大试剂盒（TYR570/兔鼠通用二抗）

一、产品概述

TSA 酪酰胺信号放大单标试剂盒（TYR‑570 / 兔鼠通用二抗）基于酪酰胺信号放大 TSA 酶学标记技术研发，采用 HRP 山羊抗兔鼠通用二抗，适配兔源、鼠源一抗，通过 HRP 酶促催化反应，实现10‑100 倍信号放大效果。 试剂盒搭载 TYR‑570 荧光底物，可兼容 TYR‑480、TYR‑520、TYR‑620、TYR‑690、TYR‑780 全系列酪胺荧光染料，既可完成单重免疫荧光检测，也可通过热修复洗脱循环，开展双标、三标及更高重数多重免疫荧光实验。热修复洗脱可以清除非共价结合的抗体复合物，保留共价锚定于组织上的荧光信号，规避传统多重染色抗体交叉反应、种属匹配难题，降低实验抗体选型门槛，适合石蜡、冰冻切片中低丰度靶蛋白的高灵敏荧光检测。

二、工作原理

酪酰胺信号放大（TSA）技术是依靠辣根过氧化物酶 HRP 对靶蛋白标记的酶学检测方法，原理与免疫组化 DAB 显色体系类似。试剂盒中 HRP 标记兔鼠通用二抗催化酪胺荧光素底物，产生活化荧光基团，活化底物能够与样本蛋白上酪氨酸、色氨酸、组氨酸残基发生共价结合，将荧光分子稳定固定在样本切片上。 完成一轮染色后，借助热修复或者抗体洗脱液洗除没有共价结合的一抗‑二抗‑HRP 复合物，共价结合的荧光染料不受洗脱影响；更换一抗、HRP 二抗以及不同光谱酪胺荧光底物，循环操作即可实现多重靶标标记。 酶促反应会在抗原抗体结合位点富集大量荧光分子，带来 10‑100 倍信号增强。每轮只孵育单组抗体，杜绝抗体交叉干扰，大幅放宽一抗种属限制；同一张切片可同时使用兔源、鼠源一抗，仅需本套兔鼠通用 HRP 二抗即可完成实验。本试剂盒 TYR 系列荧光染料可单独或者组合使用，支持单标至多重同源 / 异源抗体荧光标记。

三、产品应用

1.石蜡切片、冰冻组织切片单重及多重免疫荧光染色 (mIHC)

2.低丰度抗原的高灵敏荧光原位检测

3.兔源、鼠源一抗混合的多重标记实验

4.临床人病理组织、小鼠、大鼠等动物组织多靶标蛋白共定位

5.肿瘤微环境研究、蛋白表达定性定量、免疫组化‑荧光联合分析

四、产品特点

1.信号高效放大：酶促介导信号提升 10‑100 倍，可检出普通荧光染色难以检测的低表达抗原

2.兔鼠二抗通用：配套 HRP 山羊抗兔鼠通用二抗，兼容兔源、鼠源一抗，一抗选型更加灵活

3.多重染色拓展性强：TYR‑570 为核心底物，可搭配 TYR‑480/520/620/690/780 多色染料，实现 2‑5 重及以上多色荧光标记

4.荧光结合稳定：酪胺荧光染料和组织蛋白共价偶联，抗淬灭能力好，样本切片保存周期长

5.全套即用型试剂：荧光染料、TSA 增强剂、通用二抗、DAPI 复染液、抗体稀释液、封闭试剂、封片剂配齐，无需6.自行搭配试剂

7.广样本兼容性：适配人体临床病理样本，小鼠、大鼠等多种动物石蜡切片、冰冻切片样本

五、试剂盒组分信息

六、简要实验流程

完整详细操作步骤，请查阅配套技术文档《多重免疫荧光实验流程》

1. 组织切片脱蜡至水 / 冰冻切片复温抗原修复

2. 3% 过氧化氢封闭组织内源性过氧化物酶

3. 封闭非特异性结合位点

4. 孵育一抗 → HRP 山羊抗兔鼠通用二抗孵育

5. TSA‑TYR570 荧光底物孵育显色

6. 热修复洗脱，去除非共价结合抗体复合物（多重染色执行此步，单标可省略）

7. 多重染色则循环孵育下一靶标一抗、二抗、对应 TSA 荧光底物

8. DAPI 细胞核复染

9. 抗荧光淬灭封片剂封片，荧光显微镜采集成像

七、产品成像示例

（A）人输卵管组织：指标 A（570 黄）＋指标 B（520 绿）＋指标 C（690 粉） 

（B）小鼠肾组织：指标 A（570 黄）＋指标 B（520 绿）＋指标 C（690 粉） 

（C）人胃癌肿瘤组织：指标 A（690 粉）＋指标 B（620 红）＋指标 C（570 黄）＋指标 D（520 绿） 

（D）人肠组织：指标 A (570 黄)＋指标 B (520 绿) ＋指标 C (690 粉) ＋指标 D (620 红) ＋指标 E (480 青)