一、产品概述
TSA 酪酰胺信号放大试剂盒 (TYR520 / 兔二抗) 基于酪酰胺信号放大(TSA,Tyramide signal amplification)技术,专为多重免疫荧光 (mIHC)、免疫组化信号增强实验开发。
试剂盒利用 HRP 催化酪胺荧光底物发生共价沉积,可实现靶标信号 10~100 倍放大;独特的实验体系支持同一张组织切片上使用同源兔源一抗做多指标标记,规避传统多重荧光实验中抗体种属匹配、交叉反应难题。
配套全套即用型试剂,包含 TYR-520 荧光酪胺、HRP 山羊抗兔二抗、DAPI 核染液、抗体稀释液、淬灭试剂与抗荧光淬灭封片剂,无需额外搭配基础试剂,可完成从样本封闭、靶标染色到封片成像完整实验流程。本系列还可搭配 TYR-480/570/620/690/780 多色酪胺染料,自由组合实现单标、双标、三标及更高重数的多靶标荧光检测。
二、产品原理
酪酰胺信号放大(TSA)是基于辣根过氧化酶(HRP)介导的酶促信号放大技术。HRP 标记二抗可催化过氧化氢体系中的酪胺荧光底物活化,活化后的荧光酪胺可与组织蛋白上酪氨酸、色氨酸、组氨酸残基发生共价结合,在抗原位点大量沉积荧光分子,实现检测信号 10–100 倍增强。
完成第一轮靶标染色后,通过热修复 / 抗体洗脱方式洗脱非共价结合的一抗、二抗与 HRP 复合物,共价结合在样本上的荧光染料稳定保留;随后可直接孵育下一组同源兔源一抗与 HRP 二抗,更换其他颜色酪胺底物,重复反应即可实现多靶标连续标记。
该方案核心优势:仅需要同一种 HRP 抗兔二抗,所有靶标均可选用兔单克隆抗体,不再受限于一抗种属来源,大幅简化多重荧光实验设计。
三、试剂盒组分
名称 | 货号 | 20T 规格 | 100T 规格 | 保存条件 |
TYR-520 荧光染料 | RCF001 | 即用型,1.6mL | 即用型,8mL | -20℃ |
TSA + 增强剂 | HL101 | 浓缩型,10uL | 浓缩型,20uL | -20℃ |
HRP 山羊抗兔通用二抗 | RCB054 | 即用型,1.6mL | 即用型,8mL | 4℃ |
Dapi 染液 | RC05 | 即用型,2mL | 即用型,10mL | 4℃ |
抗体稀释液 | RC01 | 即用型,2mL | 即用型,10mL | 4℃ |
3% 过氧化氢 | RC012 | 即用型,2mL | 即用型,10mL | 4℃ |
抗荧光淬灭封片剂 | RC06 | 即用型,2mL | 即用型,10mL | 4℃ |
注:试剂盒内 TYR-520 为绿色荧光标记染料,可单独使用,也可搭配 TYR 系列其他荧光酪胺染料组合实现多色标记。
四、产品应用
多重免疫荧光(mIHC),石蜡组织切片、冰冻组织切片多靶标共定位染色
低丰度蛋白靶标信号增强,普通免疫荧光、免疫组化信号放大检测
肿瘤病理研究、组织微环境、免疫细胞多标志物共定位分析
同源兔一抗多重标记实验,解决传统多色染色种属限制问题
基础科研、临床病理机制研究、药物靶点筛选实验
五、成像案例参考
(A)人输卵管组织:指标 A(570 黄)+指标 B(520 绿)+指标 C(690 粉)
(B)小鼠肾组织:指标 A(570 黄)+指标 B(520 绿)+指标 C(690 粉)
(C)人胃癌肿瘤组织:指标 A(690 粉)+指标 B(620 红)+指标 C(570 黄)+指标 D(520 绿)
(D)人肠组织:指标 A (570 黄)+指标 B (520 绿) +指标 C (690 粉) +指标 D (620 红) +指标 E (480 青)
六、产品特点
✅ 超高信号放大:TSA 酶促沉积技术,靶标荧光信号可提升 10–100 倍,轻松检出低表达微弱蛋白
✅ 同源抗体多重标记:支持多张兔源一抗同片染色,仅需一款 HRP 抗兔二抗,摆脱种属匹配限制,无抗体交叉反应
✅ 全套即用型试剂:整套试剂盒配齐染色全套试剂,开箱即可开展实验,省去单独采购多种配套试剂的麻烦
✅ 多色灵活搭配:TYR 全系列荧光酪胺染料可选,可自由组合,实现单标至五重及以上多靶标标记
✅ 荧光共价结合稳定:荧光染料共价锚定组织蛋白,热洗脱后信号不丢失,多轮染色互不干扰
✅ 适用样本广泛:适配石蜡切片、冰冻切片,适配肿瘤组织、脏器组织等多种生物样本
七、简要实验流程
样本脱蜡 / 抗原修复 → 过氧化氢封闭内源性过氧化物酶 → 一抗孵育 → HRP 山羊抗兔二抗孵育 → TYR 荧光底物信号放大 → 热修复洗脱抗体复合物 → 下一靶标抗体循环染色 → DAPI 核染色 → 抗淬灭封片 → 荧光显微镜成像
详细标准化操作 SOP 随试剂盒配套提供。
八、参考文献
Speel E J, et al. Tyramide signal amplification (TSA) for bright-field and fluorescence in situ hybridization. Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 1999.
Bobrow M N, et al. Catalyzed reporter deposition, a novel method of signal amplification. Journal of Immunological Methods,1989.
Stack E C, et al. Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: A review, with an assessment of Tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis. Methods,2014.
