提供透射电镜（TEM）实验服务

一、技术概述

透射电子显微镜（Transmission Electron Microscopy, TEM）是研究生物组织超微结构的金标准技术，可提供亚细胞器水平（0.1-0.5 nm分辨率）的高对比度成像。本中心提供专业级生物组织TEM全流程技术服务，涵盖样品制备、超薄切片、染色观察到图像分析的全链条解决方案。

二、核心技术原理

电子穿透成像：80-300 kV电子束穿透50-100 nm超薄切片，通过散射电子成像

双重固定技术：戊二醛初固定+锇酸后固定，完美保存膜结构

环氧树脂包埋：LR White/Spurr's树脂优化切割性能

重金属染色：铀铅双染增强细胞器对比度

三、标准化服务流程

1. 样品前处理

初级固定：2.5%戊二醛（0.1M磷酸缓冲液，pH7.4，4℃）

二次固定：1%锇酸（4℃，2h）

梯度脱水：乙醇/丙酮系列（30%-100%）

树脂渗透：环氧树脂梯度浸透（12h）

2. 超薄切片制备

修块定位：钻石刀修整目标区域

切片参数：Leica UC7超薄切片机，切片厚度60-80nm

切片收集：200目铜网捞片

3. 电子染色

铀染：醋酸铀酰（20min）

铅染：柠檬酸铅（10min，CO₂环境）

4. TEM成像

设备配置：Hitachi HT7800（120kV）/JEOL JEM-1400Flash（120kV）

成像模式：

常规明场成像（BF-TEM）

高分辨成像（HRTEM）

电子衍射（SAED）（选配）

四、技术优势

原子级分辨率：0.34nm晶格分辨率，清晰显示核孔、核糖体等超微结构
双固定技术：优于常规SEM的细胞器保存效果
智能图像分析：配备iTEM Olympus图像系统，支持线粒体嵴、突触小泡等定量分析
特殊样本方案：

难切样本（骨/软骨）：配备金刚石刀超薄切片

免疫电镜：胶体金标记（5/10/15nm金颗粒可选）

五、典型应用

细胞生物学：线粒体嵴形态、内质网结构、自噬体观察
神经科学：突触小泡计数、髓鞘板层分析
病理诊断：病毒颗粒鉴定、纤维化胶原排列研究
纳米医学：药物载体胞内分布追踪

六、样本要求

最佳尺寸：1mm³组织块（固定前）

运输条件：

初级固定样本：4℃冰袋运输

未固定样本：预冷PBS+干冰速运

特殊需求：需提前说明目标观察区域（如特定细胞类型）

七、服务周期

常规流程：7-10工作日（含树脂聚合时间）

加急服务：5工作日（需额外收费）

八、数据交付

• 原始TIFF图像（2048×2048像素）

• 标尺校准文件

• 超微结构测量报告（选配）

我们为您的超微结构研究提供从样本制备到定量分析的全流程TEM技术保障！