多重免疫荧光（mIF）试剂盒｜TSA 酪酰胺信号放大，组织多靶标原位空间蛋白检测方案
一、概述
多重免疫荧光（Multiplex Immunofluorescence，mIF）是当前空间生物学、肿瘤免疫微环境研究的核心技术，依托 TSA 酪酰胺信号放大（Tyramide Signal Amplification）机制，可在单张 FFPE 石蜡切片、冰冻切片上完成多蛋白标志物原位标记，保留组织空间结构信息，实现单细胞水平的蛋白表达、细胞亚群分型、细胞互作、标志物共定位定量分析，是传统单标 IHC、普通免疫荧光无法替代的科研工具。
本款多重免疫荧光试剂盒专为组织切片多靶标染色开发，整套试剂体系经过大量病理样本验证，兼容兔源、鼠源等不同种属一抗，不受一抗种属限制，信号稳定、背景低、荧光串色可控，适配光谱共聚焦、多光谱成像系统，广泛支撑肿瘤免疫、炎症病理、神经生物学、器官发育、转化医学等方向高分论文研究。
二、技术原理
试剂盒核心采用 TSA 催化沉积信号放大技术：HRP 标记二抗结合一抗后，催化体系内酪酰胺荧光底物生成活性自由基，自由基与抗原周边蛋白酪氨酸残基发生共价结合，荧光信号稳定锚定在靶标位置；染色成像后，使用配套温和抗体剥离液去除非共价结合的一抗、二抗复合物，而共价结合的荧光信号不受洗脱破坏，即可开启下一轮靶标染色循环，多次循环后实现单张切片上 4–8 靶标甚至更多标志物同步检测，搭配光谱拆分算法，有效解决传统多色荧光光谱重叠干扰难题。
三、试剂盒组成
整套多重免疫荧光试剂盒为一站式套装，无需额外采购配套基础试剂，包含：
多色酪酰胺荧光底物（可选 488/555/594/647 等光谱组合）
HRP 标记通用二抗工作液
温和型抗体剥离液
封闭液、信号增强缓冲液
DAPI 核染色 + 抗淬灭封片二合一溶液
规格可选：20T、50T、100T，可根据样本量灵活选型；试剂 2–8℃避光保存，操作简便，适合科研实验室、病理平台批量样本上机。
四、产品核心优势
无种属限制，抗体搭配灵活依托 TSA 循环剥离体系，同一切片可使用相同宿主来源一抗，不用刻意搭配不同物种一抗，大幅降低抗体筛选门槛，科研方案设计自由度更高。
超高灵敏度，适配低丰度靶标信号放大效应显著，对低表达、难检测的稀有标志物同样具备良好检出能力，减少珍贵活检样本漏检情况，抗体使用量更低，节约抗体成本。
荧光信号稳定，抗剥离、抗淬灭荧光酪酰胺共价结合组织，反复热洗脱循环后信号不易丢失；配套抗淬灭封片液，成像、存档、多次复测信号衰减慢，可长期留存切片用于回顾分析。
低背景、低串染，成像质量高配方优化，有效抑制组织自发荧光、非特异性吸附，信噪比高，荧光通道分离度好，适配多光谱成像、共聚焦显微镜，后续定量分析数据重复性强。
节约稀缺组织样本活检、穿刺等微量组织样本非常珍贵，单切片完成多标志物检测，避免连续切片带来的组织异质性误差，保证细胞空间位置一一对应，数据更可靠。
标准化流程，可自动化适配提供详细 SOP 操作手册，人工手动染色稳定，同时兼容自动染色机，适合平台化批量样本处理，可稳定复现，满足期刊实验重复性要求。
五、主要应用场景
肿瘤免疫微环境（TME）研究：免疫细胞分型、PD-L1/CD8/CD68/CK 等标志物共定位、三级淋巴结构 TLS 分析、免疫细胞空间距离定量、免疫逃逸机制研究
肿瘤异质性、分子分型、预后标志物筛选、免疫治疗药效评估
炎症、纤维化、感染性疾病病理机制研究
神经组织、胚胎发育、器官组织空间蛋白图谱绘制
空间转录组、空间代谢组联合多组学关联验证
病理转化医学、临床样本标志物原位验证
备注：本产品仅用于科研实验，不用于临床诊断用途。
六、样本兼容类型
✅ FFPE 石蜡组织切片（最常用） ✅ 冰冻组织切片 ✅ 细胞爬片、细胞涂片
七、配套服务支持
可同步提供实验方案设计、抗体组合预实验评估、染色结果判读指导、多光谱图像拆分与细胞定量分析技术支持，协助科研人员完成方案优化，缩短实验摸索周期，助力科研团队高效产出论文数据。
八、结语
随着空间生物学研究持续升温，多重免疫荧光 mIF 已经从高端技术逐步成为病理免疫研究的常规手段。一款稳定可靠的 TSA 多重免疫荧光试剂盒，是获取高质量原位多维度蛋白空间数据的基础。上海无优生物医药持续为国内科研院所、高校、CRO、病理平台提供稳定、高性价比的多重免疫荧光全套试剂与技术支撑方案，助力科研团队高效开展空间蛋白原位研究。
